Inicio

Introducción

Capítulo 1:
Limitaciones para el estudio de células y tejidos

Capítulo 2:
Nociones básicas de óptica

Capítulo 3:
La imagen. Sistemas ópticos

Capítulo 4:
El microscopio compuesto

Capítulo 5:
El microscopio electrónico

 Capítulo 6:
Técnicas especiales de microscopía

Capítulo 7:
Nuevas tendencias

Conclusiones

Bibliografía

Anexos

 

 


  

 

LA MICROSCOPÍA:

HERRAMIENTA PARA ESTUDIAR CÉLULAS Y TEJIDOS


CAPÍTULO 5
EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO.

5.1.-Nociones elementales

5.2.-Técnicas de microscopía electrónica

5.2.1.-Diseño del microscopio electrónico de transmisión

5.2.2.-Diseño del microscopio electrónico de barrido

5.3.- Formación de la imagen en los microscopios electrónicos

5.4.-Poder de resolución: Aumentos

5.5.-Preparación de los especímenes. Contraste. Aplicaciones

5.5.1.-Microscopía electrónica de transmisión

5.5.2.-Microscopía electrónica de barrido

5.6.-Microfotografía electrónica: Interpretación de las imágenes


5.7.-Semejanzas y diferencias entre la microscopía electrónica y la microscopia de luz

5.7.1.-Semejanzas (fig. 5-12):

• Diseño y funciones de sus elementos.

• En relación al sistema de iluminación: La radiación empleada incide directamente sobre la muestra en estudio. Está conformado por una fuente emisora de la radiación y un condensador que enfoca el rayo sobre el preparado histológico.

• El espécimen se coloca entre el sistema de iluminación y los objetivos o sistemas de formación de la imagen.

• En relación al sistema óptico: Las lentes acopladas producen una imagen aumentada del espécimen en estudio. Conformado por una lente objetivo que forma una imagen intermedia y la lente proyectora (ocular, en el caso del microscopio fotónico) que a su vez aumenta la imagen intermedia para formar la imagen aumentada final.

• Pueden convertir la radiación empleada en una imagen permanente (microfotografía).

 

 

 

5.7.2.-Diferencias: Tabla 5-2

Elemento
Microscopio fotónico
Microscopio electrónico
LENTES

De cristal o vidrio, con distancias focales fijas

 

 

Magnéticas, a partir de metales magnéticos, alambre de cobre enrollado, cuya distancia focal varía en relación con la corriente que pasa por la bobina de cobre
AUMENTO

Se consigue cambiando los objetivos, rotando el revólver

 

El aumento del objetivo es fijo (distancia focal) mientras que la distancia focal de la lente proyectora varía para lograr los aumentos

PROFUNDIDAD DE CAMPO Pequeña, por lo que se pueden ver diferentes planos de enfoque al mover el tornillo micrométrico

Mayor, por lo que se puede ver enfocado todo el espesor del corte ultrafino del espécimen

 

FUENTE DE LA RADIACIÓN Haz de luz: fotones. Generalmente situada por debajo del espécimen (aunque hay excepciones) Haz de electrones.
Ubicada siempre en lo alto del instrumento, por encima del espécimen
ALTO VACÍO No es necesario Imprescindible, para facilitar el desplazamiento de los electrones
RESOLUCIÓN 0,2 µm 0,2nm

Tabla 5-2.-Comparación entre las características generales de los microscopios de luz y microscopios electrónicos.

 

 

Figura 5-12.-Comparación de tres tipos de microscopios y sus características más resaltantes. Tomado de Gartner, L., Hiatt, J. (2002). Texto Atlas de Histología (95).

 

 


 

AUTOEVALUACIÓN PARA EL CAPÍTULO 5: EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO

1. ¿Cuáles hallazgos científicos de la década de 1920-1930 fueron trascendentales para el desarrollo de la microscopía electrónica?

2. ¿Qué es un microscopio electrónico y cuál es su fundamento?

3. ¿Cuáles son las propiedades físicas del electrón que le permiten ser empleado para la obtención de imágenes microscópicas?

4. ¿En qué consiste la técnica de microscopía electrónica de transmisión?

5. ¿En qué consiste la técnica de microscopía electrónica de barrido?

6. Enumere los elementos que conforman al microscopio electrónico de transmisióny cite las propiedades de cada uno de ellos.

7. ¿Mediante cuáles mecanismos se pueden obtener electrones libres para ser utilizados en el microscopio electrónico?

8. Describa la naturaleza y tipos de lentes que se emplean en la microscopía electrónica.

9. Establezca las semejanzas y diferencias fundamentales entre las lentes electromagnéticas del microscopio electrónico y las lentes de cristal del microscopio fotónico.

10. Explique el mecanismo de formación de las imágenes al microscopio electrónico de transmisión.

11. Explique el mecanismo de formación de las imágenes al microscopio electrónico de barrido.
12. ¿Cuál es el poder de resolución del microscopio electrónico? ¿De cuáles factores depende dicho poder?

13. ¿Cómo se logra el aumento de las imágenes en el microscopio electrónico, tanto de transmisión como de barrido?

14. Explique las condiciones a tomar en cuenta al momento de realizar un preparado para ser observado al microscopio electrónico, tanto el de transmisión como el de barrido?

15. ¿Cómo se logra el contraste de la muestra en la microscopía electrónica?

16. Establezca semejanzas y diferencias entre la microscopía electrónica y la microscopía fotónica.

 



LECTURA SUGERIDA PARA EL CAPÍTULO 5:

1. Transmission Electron Microscopy (TEM) Basics.
http://www.matter.org.uk/tem/default.htm

2. Electron sources (gun). Recuperado en Diciembre 15, 2007, de la World Wide Web: http://www.matter.org.uk/tem/electron_gun/electron_sources.htm

3. Kunkle, G. (1995). Technology in the Seamless Web: "Success" and "Failure" in the History of the Electron Microscope. Technology and Culture, 36 (1), 80-103.

4. Nixon, W. (1971). The General Principles of Scanning Electron Microscopy. Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences, 261 (837), 45-50.

5. Freundlich, M. (1963). Origin of the Electron Microscope. Science, New Series, 142 (3589) 185-188.

6. 100 Years of Elementary Particles. S tanford Linear Accelerator Center. Spring 1997, Vol. 27, No.1 (Revista electrónica de Física).

 

 
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